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細胞培養相關
聚合酶鏈反應（英文(wén)全稱：Polymerase Chain Reaction），簡稱PCR。聚合酶鏈反應（PCR）是體(tǐ)外酶促合成特異DNA片段的一種方法，由高溫變性、低溫退火（複性）及适溫延伸等幾步反應組成一個周期，循環進行，使目的DNA得以迅速擴增，具(jù)有(yǒu)特異性強、靈敏度高、操作(zuò)簡便、省時等特點。它不僅可(kě)用(yòng)于基因分(fēn)離、克隆和核酸序列分(fēn)析等基礎研究，還可(kě)用(yòng)于疾病的診斷或任何有(yǒu)DNA,RNA的地方．聚合酶鏈反應（Polymerase Chain Reaction，簡稱PCR）又(yòu)稱無細胞分(fēn)子克隆或特異性DNA序列體(tǐ)外引物(wù)定向酶促擴增技(jì )術。DNA的半保留複制是生物(wù)進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多(duō)種酶的作(zuò)用(yòng)下可(kě)以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啓動子的參與下，根據堿基互補配對原則複制成同樣的兩分(fēn)子拷貝。在實驗中(zhōng)發現，DNA在高溫時也可(kě)以發生變性解鏈，當溫度降低後又(yòu)可(kě)以複性成為(wèi)雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和複性，并設計引物(wù)做啓動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可(kě)以完成特定基因的體(tǐ)外複制。但是，DNA聚合酶在高溫時會失活，因此，每次循環都得加入新(xīn)的DNA聚合酶，不僅操作(zuò)煩瑣，而且價格昂貴，制約了PCR技(jì )術的應用(yòng)和發展。發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用(yòng)有(yǒu)裏程碑的意義，該酶可(kě)以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環加酶，使PCR技(jì )術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技(jì )術得以大量應用(yòng)，并逐步應用(yòng)于臨床。
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