透析是利用(yòng)半透膜的選擇性在溶液裏分(fēn)離大分(fēn)子和小(xiǎo)分(fēn)子的一種分(fēn)離技(jì )術，常常用(yòng)于除去蛋白或核酸樣品中(zhōng)的鹽、變性劑、還原劑之類的小(xiǎo)分(fēn)子雜質(zhì)，有(yǒu)時也用(yòng)于置換樣品緩沖液。樣品在膜的一邊，緩沖液在另一邊，小(xiǎo)分(fēn)子即向兩邊擴散直到平衡，而大分(fēn)子則由于半透膜的阻攔而留在一端，通過不斷更換緩沖液，即可(kě)将樣品中(zhōng)要除掉的小(xiǎo)分(fēn)子稀釋到足夠低的濃度。

技(jì )術參數：

       △PH穩定範圍 : 5-9

       △污染物(wù)水平: 硫化物(wù)<0.3%; 重金屬<50ppm

       △化學(xué)兼容性: 與很(hěn)多(duō)鹽兼容，比如CaCl2, (NH4)2SO4；還可(kě)與分(fēn)子生物(wù)學(xué)及酶學(xué)中(zhōng)常用(yòng)的水溶劑、有(yǒu)機溶劑兼容，比如異丙醇、乙醇和丙酮。

       △溫度抵抗性：可(kě)煮沸，可(kě)高壓滅菌。

       △蛋白吸附  ：每克透析袋吸附蛋白量小(xiǎo)于1ng 

 

 

透析袋使用(yòng)前處理(lǐ)方法:

1. 把透析袋剪成适當長(cháng)度（10-20cm）的小(xiǎo)段。

2. 在大體(tǐ)積的2%(W/V)碳酸氫鈉和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中(zhōng)将透析袋煮沸10分(fēn)鍾。

3. 用(yòng)蒸餾水徹底清洗透析袋。

4. 放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中(zhōng)将之煮沸10分(fēn)鍾。

5. 冷卻後，存放于4度，必須确保透析袋始終浸沒在溶液内。從此時起取用(yòng)透析袋是必須戴手套。

6. 用(yòng)前在透析袋内裝(zhuāng)滿水然後排出，将之清洗幹淨。

7.實驗要求不高的可(kě)以用(yòng)簡易處理(lǐ)方法：在沸水中(zhōng)煮10min即可(kě)使用(yòng)。

 

透析袋的選擇：

（1）正确選擇合适的截留分(fēn)子量

     截留分(fēn)子量的選擇是以預留在膜内的大分(fēn)子的分(fēn)子量和将要被除去的小(xiǎo)分(fēn)子污染物(wù)的分(fēn)子量為(wèi)基礎的。

     為(wèi)達到合理(lǐ)有(yǒu)效的分(fēn)離，需分(fēn)離的兩種物(wù)質(zhì)分(fēn)子量的比率至少為(wèi)25.

     選擇截留分(fēn)子量的經驗法則：選擇截留分(fēn)子量值約為(wèi)要保留的大分(fēn)子分(fēn)子量的一半，以獲得至少90%

     的保留率。

 

（2）正确選擇扁平寬度

     透析袋扁平寬度的選擇取決于樣品體(tǐ)積和透析容量。較小(xiǎo)的透析管透析更快；較大的透析管因擴散

     距離較長(cháng)透析較慢。為(wèi)易于使用(yòng)，建議使用(yòng)總長(cháng)（包括閉合夾和頂部空間）為(wèi)大約10-15厘米的透析袋

 

（3）透析袋的化學(xué)相容性

     化學(xué)相容性主要用(yòng)作(zuò)使用(yòng)指導，不作(zuò)為(wèi)化學(xué)相容的保證。溫度，濃度，長(cháng)時間曝光等因素的改變可(kě)能(néng)

     影響産(chǎn)品的使用(yòng)。建議您自設條件進行測試。

 

透析袋的使用(yòng)：

下述透析程序是一個普遍的基礎透析過程。在開始透析之前應考慮到許多(duō)變數。

透析樣品溶劑、膜的化學(xué)相容性、膜的截留分(fēn)子量，透析溶劑、透析體(tǐ)積、溫度等變量都會影響透析速率，因此，一些應用(yòng)中(zhōng)下述透析過程可(kě)能(néng)需要适當的變化。

    1． 把适量的透析液（緩沖液）加入透析裝(zhuāng)置。透析液的體(tǐ)積應為(wèi)樣品體(tǐ)積量的100倍。

       （例如：在一升透析液中(zhōng)透析10毫升的樣品）

    2． 裁剪适當長(cháng)度的透析管。預留一段額外長(cháng)度（約占總樣品體(tǐ)積量的20%）作(zuò)為(wèi)頭部空間。

    3． 把透析管插入打開的透析夾，在約超出透析夾3-5毫米的位置再夾住。不要折疊透析袋。

    4． 由透析管開口端将樣品裝(zhuāng)入。調整一下頂部空間的長(cháng)度，夾緊透析夾。

    5． 把透析樣品放在合适的透析緩沖液中(zhōng)。

    6． 透析要根據具(jù)體(tǐ)的應用(yòng)需求。通常情況下，允許經過一夜透析。在持續透析的過程中(zhōng)，至少要進行3次全部更換透析液。

        建議在（透析後）2-4小(xiǎo)時，6-8小(xiǎo)時和10-14小(xiǎo)時（第2天早晨）更換透析液。

        在後一次透析液的更換後要至少繼續進行2小(xiǎo)時的透析。

        注：對于高濃度污染物(wù)，樣品可(kě)能(néng)需要較長(cháng)的時間透析，透析液需要更頻繁的更換。

    7． 透析溫度主要取決于樣品。溫度限制主要取決于膜的類型。

        纖維素透析袋可(kě)以承受的溫度高達37℃，再生纖維素透析袋可(kě)以承受的溫度高達60℃。