一、實驗介紹
在真核生物(wù)中(zhōng)發現的具(jù)有(yǒu)調控功能(néng)的內源性非編碼RNA,大小(xiǎo)約20-25個核苷酸,我們根據成熟miRNA序列信息,合成含有(yǒu)莖環結構的前體miRNA連接至測翼序列的表達在體中(zhōng),將其轉染/病毒包裝感染進入細胞後,由II型啟動子(CMV)啟動表達,經核酸酶的剪切加工(gōng),組裝RNA誘導的沉默複合體,通過鹼基互補配對的方式識別靶mRNA,並根據互補程度的不同指導沉默複合體降解靶mRNA或者阻擋mRNA的翻譯
二、實驗週期
25-30工(gōng)作(zuò)日
三、交付標準
慢病毒抑制載體構建,慢病毒包裝與純化,滴度測定
四、客戶提供
miRNA序列信息
五、實驗流程
合成pre-miRNA序列 連接至miRNA表達載體 挑選陽性克隆測序驗證
慢病毒包裝 構建miRNA慢病毒表達載體 慢病毒包裝 滴度檢測
腺病毒包裝 構建miRNA腺病毒表達載體 腺病毒包裝 滴度檢測
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