瓊脂糖，分(fēn)析級，膠強度（1% gel）：1250g/cm²

本公(gōng)司產品優選石花(huā)菜原料進行提取，以保證強度和透明澄清度等等，因此顔色或性狀會不同於Biowest品牌的Agarose，並非受潮或質量問題，可(kě)放心使用(yòng)

RNA的瓊脂糖凝膠電(diàn)泳實驗原理(lǐ)和步驟:

RNA電(diàn)泳可(kě)以在變性及非變性兩種條件下進行。非變性電(diàn)泳使用(yòng)1.0%--1.4%的凝膠，不同的RNA條帶也能(néng)分(fēn)開，但無法判斷其分(fēn)子量。

隻有(yǒu)在完全變性的條件下，RNA的泳動率才與分(fēn)子量的對數呈線(xiàn)性關系。因此要測定RNA分(fēn)子量時，一定要用(yòng)變性凝膠。

在需快速檢測所提總RNA樣品完整性時，配制普通的1%瓊脂糖凝膠即可(kě)。

實驗步驟:

（1）用(yòng)1×TAE電(diàn)泳緩沖液制作(zuò)瓊脂糖凝膠，加1×TAE電(diàn)泳緩沖液至液面覆蓋凝膠。

（2）在超淨工(gōng)作(zuò)台上，用(yòng)移液器吸取總RNA樣品4μl于封口膜上。在實驗台上再加入5μl 1×TAE電(diàn)泳緩沖液及1μl 的10X載樣緩沖液，混勻後，小(xiǎo)心加入點樣孔。

（3）打開電(diàn)源開關，調節電(diàn)壓至100V，使RNA由負極向正極電(diàn)泳，約30min後将凝膠放入EB染液中(zhōng)染色5min,用(yòng)清水稍微漂洗。在紫外透射檢測儀上觀察RNA電(diàn)泳結果。

RNA的變性瓊脂糖凝膠檢測:

操作(zuò)：

 

（1） 将制膠用(yòng)具(jù)用(yòng)70%乙醇沖冼一遍，晾幹備用(yòng)。

 

（2） 配制瓊脂糖凝膠。

 

①稱取0.5g瓊脂糖，置幹淨的100ml 錐形瓶中(zhōng)，加入40ml蒸餾水，微波爐内加熱使瓊脂糖徹底溶化均勻。

 

②待膠涼至60--70 ℃，依次向其中(zhōng)加入9ml 甲醛、5ml 10X MOPS緩沖液和0.5ul 溴化乙錠，混合均勻。

 

③灌制瓊脂糖凝膠。

 

（3） 樣品準備：

 

① 取 DEPC處理(lǐ)過的500ul小(xiǎo)離心管，依次加入如下試劑： 10x MOPS緩沖液2ul，甲醛3.5ul,甲酰胺（去離子）10ul，RNA 樣品 4.5ul,混勻。

 

② 将離心管置于60℃水浴中(zhōng)保10分(fēn)鍾，再置冰上2分(fēn)鍾。

 

③ 向管中(zhōng)加入3ul 上樣染料，混勻。

 

（4）上樣。

 

（5）電(diàn)泳：電(diàn)泳槽内加入1XMOPS緩沖液，于7.5V/ml 的電(diàn)壓下電(diàn)泳。

 

（6）電(diàn)泳結束後，在紫外燈下檢查結果。