RNase A 20mg/ml (RNA酶 A溶液)
産(chǎn)品名(míng)稱:RNase A (20mg/ml)
中(zhōng)文(wén)別名(míng): RNA酶 A 溶液
産(chǎn)品CAS :9001-99-4
産(chǎn)品編碼:R006L-5ml
核糖核酸酶A(Ribonuclease A,RNase A),一種含4個二硫鍵的單鏈多(duō)肽,分(fēn)子量約為(wèi)13.7 kDa。
作(zuò)為(wèi)一種核糖核酸内切酶(endoribonuclease),特異性降解單鏈RNA上的胞嘧啶(C)或尿嘧啶(U)殘基。
具(jù)體(tǐ)來說,切割識别的是由某核苷酸上的5’-核糖和相鄰的嘧啶類核苷酸3’-核糖上磷酸基團形成的磷酸
二酯鍵,從而使得2’,3’-環磷酸水解為(wèi)對應的3’-核苷磷酸。
RNase A切割單鏈RNA活性最高,且在多(duō)種反應條件下均有(yǒu)活性:在低鹽濃度(0-100 mM NaCl)下,
可(kě)用(yòng)來切割單鏈RNA、雙鏈RNA以及RNA-DNA雜交形成的RNA鏈,而高鹽濃度(≥0.3 M)下,
RNase A僅特異性切割單鏈RNA。
核糖核酸酶A(RNase A)最常見的應用(yòng)在于質(zhì)粒DNA或基因組DNA制備過程中(zhōng)去除RNA,
因此制備過程中(zhōng)DNase酶活性的存在與否是需要重視的污染之一,可(kě)采用(yòng)水浴煮沸
這種傳統方法來滅活DNase活性。
另外,本品還可(kě)用(yòng)于RNA酶保護分(fēn)析、RNA序列分(fēn)析等分(fēn)子生物(wù)學(xué)實驗。
本品以溶液形式提供,濃度為(wèi)20 mg/mL。
推薦工(gōng)作(zuò)濃度為(wèi)1-100 μg/mL,因應用(yòng)類型的不同而異。
用(yòng)于各種常見的分(fēn)子生物(wù)學(xué)、細胞生物(wù)學(xué)等相關實驗。
(2)确定DNA或RNA中(zhōng)單堿基突變的位置(Myers et al.1985,Winter et al.1985)。 在此方法中(zhōng),RNA-DNA或RNA-RNA雜合體(tǐ)上的單堿基錯配可(kě)被RNA酶A識别并切割。利用(yòng)含SP5或T7噬菌體(tǐ)啓動子的質(zhì)粒,在體(tǐ)外合成與野生型DNA或RNA互補的32p标記RNA探針,然後與待檢含單堿基置換的DNA或RNA退火, 所産(chǎn)生的單堿基錯配可(kě)用(yòng)RNA酶A切割,通過凝膠電(diàn)泳分(fēn)析切割産(chǎn)物(wù)的大小(xiǎo)即可(kě)确定錯配的位置。在所有(yǒu)各種可(kě)能(néng)的單堿基錯配中(zhōng),大約50%可(kě)用(yòng)此法确定。
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