RNA wait (非凍型組織RNA保存液)
産(chǎn)品名(míng)稱:RNA wait
中(zhōng)文(wén)別名(míng): 非凍型組織RNA保存液
産(chǎn)品編碼:R008-100ml
RNA 高效保存液(RNAwait)是一種無毒的可(kě)直接使用(yòng)的樣品儲存液,
能(néng)使細胞内的 RNA 與 RNA 酶分(fēn)離,可(kě)以快速可(kě)靠地保存動物(wù)組織、細胞内的 RNA。
組織獲取後立即浸 入 RNAwait 保存液中(zhōng),在室溫可(kě)以保存 7 天,4℃可(kě)以保存 4 周,
-20℃、-80℃标本可(kě)以長(cháng)期保存,RNA 穩定存在不降解,
取出後用(yòng)各類方法抽提可(kě)以獲得高質(zhì)量的 RNA
15–25°C,保質(zhì)期 2 年。
低溫條件下有(yǒu)結晶析出時加熱至 37°C 溶解後使用(yòng)
注意事項:
1、組織和細胞取材速度要快,在獲取後應當盡快浸入 RNAwait,以防止 RNA 降解。
2、冰凍組織不能(néng)用(yòng) RNAwait 保存,因為(wèi) RNAwait 不能(néng)有(yǒu)效滲入冰凍組織。
3、保存樣品的 RNA 提取:樣本從-20℃或-80℃冰箱取出後,複溫到室溫後,取出組織塊,再用(yòng)于提取 RNA。
細胞樣本則複溫後低速離心收集細胞,去除 RNAwait,再用(yòng)于提取 RNA。
後繼的處理(lǐ)(如組織勻漿)可(kě)以在室溫下進行,不必在液氮中(zhōng)操作(zuò),RNA 仍能(néng)有(yǒu)效 得到保護。
殘留少量 RNAwait 保存液不影響後繼提取 RNA 的質(zhì)量。
4、RNAwait 在動物(wù)組織(如大鼠肝髒,脾髒)和細胞(如 DH5α)RNA 的保護中(zhōng)效果 不錯;
植物(wù)材料種類繁多(duō),沒能(néng)一一測試(煙草(cǎo)和拟南芥葉片中(zhōng)的 RNA 能(néng)被 RNAwait 有(yǒu)效 保護),建議預實驗後再使用(yòng),
适用(yòng)範圍 :
●新(xīn)鮮組織(動,植物(wù));培養細菌,全血,血液
●需提采集多(duō)個樣本,且采集時間、空間跨度較大;
●不方便馬上提取 RNA而又(yòu)沒有(yǒu)液氮或超低溫冰箱保存樣品;
●室溫下或隻用(yòng)冰的條件下長(cháng)途運輸樣品。
操作(zuò)流程:
1、根據要保存的各樣本的體(tǐ)積,計算出所需 RNAwait 用(yòng)量。RNAwait 的用(yòng)量應當是組 織體(tǐ)積的 10 倍(100 mg 組織約用(yòng) 1ml RNAwait);
離心收集 2×10 7細胞 RNAwait 的用(yòng)量是 1ml。
加入 RNAwait 的原則是:量甯多(duō)勿少。
建議在實際操作(zuò)中(zhōng)不要稱量組織,而直接根據目測結果加入 RNAwait 量,以加快操作(zuò)和減少污染。
例如 5mm 邊長(cháng)的立方體(tǐ)組織塊,體(tǐ)積為(wèi) 125mm3=125µl,故應當加入 1.25ml 的 RNAwait 液。
2、将 RNAwait 按需要量分(fēn)裝(zhuāng)入自備保存管中(zhōng);
3、快速将較大的組織切成厚度<0.5 cm 的任意片狀,較小(xiǎo)的組織直接取下,立即完全浸 入 RNAwait 中(zhōng)。
注:組織的厚度一定要<0.5 cm。組織過厚則 RNAwait 不能(néng)有(yǒu)效滲入,組織中(zhōng)間部位的 RNA 不能(néng)受到保護。
較大的組織可(kě)以切成厚度<0.5 cm 的任意片狀後保存,較小(xiǎo)的組織
(如 大鼠的腎髒、脾髒,小(xiǎo)鼠的大部分(fēn)器官)則可(kě)以直接浸入 RNAwait。
4、保存時先将樣本浸入 RNAwait 後置 4℃冰箱過夜
(注:4℃過夜是必需的,這樣可(kě) 使 RNAwait 完全滲入到組織中(zhōng)),
然後轉移到-20℃冰箱(RNAwait 在-20℃時仍為(wèi)液态, 如有(yǒu)結晶析出,也是正常情況);
或者在 4℃冰箱過夜後,從 RNAwait 中(zhōng)取出組織塊,将組織塊轉移到-80℃冰箱。
在 RNAwait 中(zhōng)保存的标本,反複凍融至室溫 20 次不影響 RNA 的 質(zhì)量
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