Agarose LE (低電(diàn)滲瓊酯醣)
産(chǎn)品名(míng)稱:Agarose LE
【low EEO, gel strength: ≥1000 g/cm2 (1% gel)】
中(zhōng)文(wén)別名(míng):瓊酯醣(低電(diàn)滲)
産(chǎn)品CAS :9012-36-6
産(chǎn)品編碼:A006L-100g
瓊脂糖,分(fēn)析級,膠強度(1% gel):1000g/cm2
本公(gōng)司產品優選石花(huā)菜原料進行提取,以保證強度和透明澄清度等等,因此顔色或性狀會不同於Biowest品牌的Agarose,並非受潮或質量問題,可(kě)放心使用(yòng)
凝膠配制操作(zuò)步驟
1. 配制适量的制膠及電(diàn)泳緩沖液(常用(yòng)0.5 x TBE或1 x TAE緩沖液);
2. 根據制膠量及凝膠濃度,将準确稱量的瓊脂糖粉末加入含有(yǒu)一定量的電(diàn)泳緩沖液玻璃三角錐形瓶中(zhōng)(加入電(diàn)泳緩沖液體(tǐ)積不宜超過錐形瓶50%的容量);
3. 使用(yòng)保鮮膜或PE手套套在錐形瓶口上,然後在微波爐中(zhōng)加熱溶解瓊脂糖(注意:當加熱時溶液沸騰後,請帶上隔溫手套,小(xiǎo)心晃動錐形瓶,使瓊脂糖充分(fēn)均勻溶解,重複此操作(zuò)數次,直至瓊脂糖顆粒完全溶解;在微波爐中(zhōng)加熱時間不宜過長(cháng),每次當溶液開始沸騰起泡時停止加熱,否則容易引起溶液過熱暴沸外溢出來,造成凝膠濃度不精(jīng)确;同時瓊脂糖溶解時,必須保證其完全徹底溶解,否則會造成電(diàn)泳圖像模糊或者有(yǒu)亮點顆粒呈現);
4. 待溶液冷卻至50℃左右時,可(kě)加入一定比例的核酸染料(GelRed核酸染料或其他(tā)核酸染料等)後并充分(fēn)混勻;
5. 将瓊脂糖溶液倒入制膠槽中(zhōng),選擇合适梳子并插入對應位置,凝膠厚度一般控制在3-5mm之間,如後續實驗需要選擇切膠回收膠條中(zhōng)的核酸,可(kě)适當增加凝膠厚度,如凝膠中(zhōng)有(yǒu)氣泡需将其趕出。
6. 在室溫下30 min左右凝膠即可(kě)凝固(不同濃度凝膠凝固時間不同,根據實際情況調整),拔出梳子後凝膠置于電(diàn)泳槽中(zhōng)電(diàn)泳使用(yòng),電(diàn)泳緩沖液宜沒過凝膠中(zhōng)的加樣孔。
1.5×TBE緩沖液放置時間過久會沉澱,因此一次性不要配太多(duō)。工(gōng)作(zuò)用(yòng)電(diàn)泳緩沖液為(wèi)0.5×TBE緩沖液,
取5×TBE緩沖液貯存液稀釋,現配現用(yòng)。
2.用(yòng)于電(diàn)泳的緩沖液和用(yòng)于制膠的緩沖液必須統一。
3.瓊脂糖粉在微波爐中(zhōng)加熱時間不宜過長(cháng),每次當溶液起泡沸騰時停止加熱,否則會引起溶液過熱暴沸,
造成瓊脂糖凝膠濃度不準,也會損壞微波爐。溶解瓊脂糖時,必須保證瓊脂糖充分(fēn)完全溶解,否則,
會造成電(diàn)泳圖像模糊不清。
4.凝膠不立即使用(yòng)時,請用(yòng)保鮮膜将凝膠包好後在4℃下保存,一般可(kě)保存2-5天。
應用(yòng)
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