低熔點瓊脂糖（Low melting point agarose）是經過改良使得成膠溫度和熔點更低的瓊脂糖，并且通過認證（遺傳質(zhì)量認證）相比于常規瓊脂糖，分(fēn)子篩特性更好，條帶清晰度更高。非常适用(yòng)于分(fēn)子量大于1000 bp核酸的分(fēn)離以及電(diàn)泳後核酸片段的回收（因其約在65.5°C熔化，幾乎低于所有(yǒu)核酸分(fēn)子的熔點）。低熔點瓊脂糖凝膠電(diàn)泳純化回收的DNA膠條重熔後，可(kě)以直接用(yòng)于制備放射性同位素标記的DNA探針。限制性酶切核酸片段經低熔點瓊脂糖凝膠電(diàn)泳分(fēn)離後，切膠回收的核酸膠條重熔後也可(kě)以非常方便的直接克隆到質(zhì)粒中(zhōng)。本品也适用(yòng)于組織培養細胞的克隆和病毒空斑實驗。
·極高的分(fēn)辨率
·好溶解，膠液更清澈，可(kě)以配制高至4%凝膠
·EEO ≤ 0.10
·凝膠溫度 26℃ -30℃ (1.5% gel)
·融膠溫度 ≤65℃ (1.5% gel)
·凝膠強度 ≥200g/cm2(1.0% gel)
凝膠制備方法:
1. 配制适量的電(diàn)泳及制膠用(yòng)的緩沖液。根據電(diàn)泳需要，配置合适濃度的電(diàn)泳及制膠緩沖液。
注：用(yòng)于電(diàn)泳的緩沖液和用(yòng)于制膠的緩沖液必須是相同的。
2. 根據制膠量及凝膠濃度，在加有(yǒu)一定量的電(diàn)泳緩沖液的三角錐瓶中(zhōng)，加入準确稱量的瓊脂糖粉
（總液體(tǐ)量不宜超過三角錐瓶的50%容量）。
3. 在微波爐中(zhōng)加熱溶解瓊脂糖，設置中(zhōng)火加熱至沸騰，保持膠液沸騰約 30 秒(miǎo)鍾，戴上防熱手 套，移開三角錐瓶，
小(xiǎo)心搖動三角錐瓶，重懸未溶解顆粒，再次用(yòng)高火加熱 1 分(fēn)鍾，
或直至瓊脂糖完全溶解。請戴上防熱手套，小(xiǎo)心搖動三角錐瓶，使瓊脂糖膠液充分(fēn)均勻。
注：必須保證瓊脂糖充分(fēn)完全溶解，此時瓊脂糖膠液清澈,否則，會造成電(diàn)泳圖像模糊 不清。
加熱時如膠液劇烈沸騰發泡，停止加熱。微波爐中(zhōng)加熱時間不宜過長(cháng)。
4. 使溶液冷卻至 60℃左右，如需要可(kě)在此時加入溴化乙錠(EB)溶液使其終濃度為(wèi) 0.5ug/ml, 并充分(fēn)混勻。
注：溴化乙錠是一種緻癌物(wù)質(zhì)。使用(yòng)含有(yǒu)溴化乙錠的溶液時，請戴用(yòng)手套。
5. 将瓊脂糖溶液倒入制膠模中(zhōng)，然後在适當位置處插上梳子。凝膠厚度一般在 3－5mm 之間。
6. 在室溫下使膠凝固（大約 30 分(fēn)鍾－1 小(xiǎo)時），然後放置于電(diàn)泳槽中(zhōng)進行電(diàn)泳。
注：凝膠不立即使用(yòng)時，請用(yòng)保鮮膜将凝膠包好後在 4℃下保存，一般可(kě)保存 2-5 天。
魯公(gōng)網安(ān)備 37021202000795号