PCR Master Mix (即用(yòng)型 PCR Master Mix 含染料)
産(chǎn)品名(míng)稱:PCR Master Mix (2X) 【Ready to load】
中(zhōng)文(wén)別名(míng): 即用(yòng)型 PCR Master Mix 含染料
産(chǎn)品編碼:P002-5000ul
本産(chǎn)品是将 PCR 反應所需的 Taq 酶、dNTP 混合物(wù)、MgCl2以及反應緩沖液預先
配制成 2 倍濃度的混合物(wù),並且含有(yǒu)染料(Blue Dye)。
使用(yòng)時隻需加入模闆和引物(wù)便可(kě)進行PCR反應,大大簡化了操作(zuò)過程,提高了檢測通量和結果的重現性。
本品含雙藍染料,反應結束後可(kě)直接進行電(diàn)泳,使用(yòng)方便。
本産(chǎn)品擴增得到的PCR産(chǎn)物(wù)3’端帶A,可(kě)直接克隆至T載體(tǐ)。
·擴增長(cháng)度可(kě)達 8kb,能(néng)對 4kb及其以下長(cháng)度的片段進行高效地擴增。
·含染料,染料的加入不影響PCR 反應,反應産(chǎn)物(wù)可(kě)直接電(diàn)泳檢測,節省時間。
·使用(yòng)本産(chǎn)品擴增得到的 PCR 産(chǎn)物(wù) 3' 端附有(yǒu)一個"A"堿基, 因此可(kě)直接克隆于 T-Vector 中(zhōng)。
·每次使用(yòng)較少時,請将 2×Taq 酶 PCR 反應混合液溶解後輕輕混勻分(fēn)裝(zhuāng)到 PCR 反應管中(zhōng) -20℃保存,避免反複凍融,
影響産(chǎn)品的性能(néng)及反複使用(yòng)而産(chǎn)生污染。
質(zhì)量控制
核酸外切酶殘留檢測:20 μl本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小(xiǎo)時,DNA的電(diàn)泳譜帶不發生變化。
核酸外内酶殘留檢測:20 μl本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小(xiǎo)時, DNA的電(diàn)泳譜帶不發生變化。
大腸杆菌殘留DNA檢測: 50 μl體(tǐ)系中(zhōng),以ddH2O為(wèi)模闆,擴增E.coil 16s rDNA基因。35個循環後擴增産(chǎn)物(wù)進行1% 瓊脂糖凝膠電(diàn)泳,EB染色,無擴增條帶。
功能(néng)檢測:50 μl體(tǐ)系中(zhōng),以100 ng人基因組DNA為(wèi)模闆擴增α-1-antitrypsin基因。30個循環後取10% PCR産(chǎn)物(wù)進行1% 瓊脂糖凝膠電(diàn)泳,EB染色,觀察到單一的360 bp條帶。
穩定性檢測: PCR Master Mix 分(fēn)别在-20 ºC放置1年、4 ºC放置3個月、25 ºC放置1個月後,菌落PCR擴增1.2 kb片段。電(diàn)泳結果顯示2×PCR Master Mix具(jù)有(yǒu)非常好的穩定性
實驗用(yòng)途:常規 PCR 擴增/鑒定;基因分(fēn)型;制備TA 克隆用(yòng)的PCR 産(chǎn)物(wù)。
PCR反應性能(néng):
以λ DNA為(wèi)模闆,可(kě)以很(hěn)好地擴增8 kb的DNA片段。
以人基因組DNA為(wèi)模闆,可(kě)很(hěn)好地擴增3 kb(p53基因)的DNA片段。
産(chǎn)品使用(yòng)方便快捷,能(néng)避免 PCR 操作(zuò)過程中(zhōng)的污染,使用(yòng)時隻需取适量2×Taq PCR MasterMix溶液,加入模闆和引物(wù),
并加入去離子水補足體(tǐ)積,使MasterMix溶液濃度為(wèi)1×即可(kě)進行反應。
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